1. 首页
  2. 技术资料
  3. 基础知识资料
  4. 内容

微生物实验室常见20种培养基配方大全

日期:2019-01-06 人气:674

一、糖发酵管

成分:

牛肉膏 5g

蛋白胨 10g

氯化钠 3g

磷酸氢二钠  2g

0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12mL

蒸馏水 1000mL

PH 7.4

制法

1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min。

2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶1000 mL,121℃高压灭菌15min。另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌。将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内,以无菌操作分装小试管。

注:

蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌。


试验方法:

从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2~3d。迟缓反应需观察14~30d。


 二、乳糖胆盐发酵管

成分:

蛋白胨 20g

猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g

乳糖 10g

0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL

蒸馏水 1000mL

制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10 mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。

注:

双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。


 三、5%乳糖发酵管

成分:

蛋白胨 0.2g

氯化钠 0.5g

乳糖 5g

2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL

蒸馏水 100mL

pH 7.4

制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121 ℃ 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。

注:

在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。


 

四、缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)

成分:

磷酸氢二钾 5g

多胨 7g

葡萄糖 5g

蒸馏水 1000mL

制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL ,121℃高压灭菌15min。

甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~5d,哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养。滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果。鲜红色为阳性,黄色为阴性,甲基红试剂配法:10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中,然后加入20 mL蒸馏水。

V-P试验:用琼脂培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~4d。哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养。加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL充分振摇试管,观察结果阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36±1℃下培养4h再进行观察。

 

五、营养明胶

成分:

蛋白胨 5g

牛肉膏 3g

明胶 120g

蒸馏水 1000mL

pH 6.8~7.0

制法:加热溶解,校正至pH7.4~7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固,复查最终pH应为6.8~7.0。

试验方法:

用琼脂培养物穿刺接种,放在22~25℃培养,每天观察结果,记录液化时间。或放在36士1℃培养,每天取出,放冰箱内30min后再观察结果。


六、苯丙氨酸培养基

成分:

酵母浸膏 3g

DI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g)2g

磷酸氢二钠 1g

氯化钠 5g

琼脂 12g

蒸馏水 1000mL

制法:加热溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min,使成斜面。

试验方法:

自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂,在36士1℃培养4h或18~24h,滴加10%三氯化铁溶液2~3滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色。

 

七、蛋白胨水(靛基质试验用)

成分:

蛋白胨(或胰蛋白胨)20g

氯化钠 5g

蒸馏水 1000mL

pH7.4

制法:按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min。

靛基质试剂

柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入浓盐酸25ml。

欧-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内,然后缓慢加入浓盐酸20 ml。试验方法:挑取小量培养物接种,在36士1℃培养1~2d,必要时可培养4~5d。加入柯凡克试剂约0.5mL,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约0.5 mL,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。

注:

蛋白胨中应含有丰富的色氨酸。每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用。

 

八、硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)

成分:

牛肉膏 3g

酵母浸膏 3g

蛋白胨 10g

硫酸亚铁 0.2g

硫代硫酸钠 0.3g

氯化钠 5g

琼脂 12g

蒸馏水 1000 mL

制法:加热溶解,校正pH,分装试管,115℃高压灭菌15min,取出直立候其凝固。

试验方法:

挑取琼脂培养物,沿管壁穿刺,于36士1℃培养1~2d,观察结果。产硫化氢者使培养基变为黑色。

注:

肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生,应采用三糖铁琼脂或本培养基。


 九、尿素琼脂

成分:

蛋白胨 1g

氯化钠5g葡萄糖1g

磷酸二氢钾 2g

4%酚红溶液 3 mL

琼脂 20g

蒸馏水 1000 mL

20%尿素溶液 100mL

制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶。121℃高压灭菌15min。冷至50~55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液,尿素的最终浓度为2%,最终pH应为7.2±0.1.分装于灭菌试管内,放成斜面备用。

试验方法:

挑取琼脂培养物接种,在36士1℃培养24h,观察结果。尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色。


 十、氰化钾(KCN)培养基

成分:

蛋白胨10g

氯化钠 5g

磷酸二氢钾 0.225g

磷酸氢二钠 5.64g

蒸馏水 1000 mL

0.5%氰化钾溶液 20 mL

pH 7.6

制法:将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。放在冰箱内使其充分冷却。每100 mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1:10000),分装于12mm*100mm灭菌试管,每管约4mL,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,放在4℃冰箱内,至少可保存两个月。同时,将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用。

 

十一、营养琼脂

成分:

蛋白胨10g

牛肉膏3g

氯化钠5g

琼脂15~20g

蒸馏水1000mL

制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2~7.4。加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。

注:

此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%。


 十二、营养肉汤

成分:

蛋白胨 10g

牛肉膏 3g

氯化钠 5g

蒸馏水 1000mL

pH7.4

制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225 mL ,121℃高压灭菌15min。

 

十三、缓冲蛋白胨水(BP)

成分:

蛋白胨 10g

氯化钠 5g

磷酸氢二钠 9g

磷酸二氢钾 1.5g

蒸馏水1000mL

pH 7.2

制法:按上述成分配好后以大烧瓶装,121℃高压灭菌15min。临用时无菌分装每瓶225mL。

注:本培养基供沙门氏菌前增菌用。

注:

本培养基供沙门氏菌前增菌用。


十四、EC肉汤

成分:

胰蛋白胨 20g

3号胆盐(或混合胆盐)1.5g

你觉得这篇文章怎么样?

630

标签:微生物实验室常见20种培养基配方大全
相关内容